脂肪酶测定方法

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脂肪酶广泛的存在于动植物和微生物中,植物中含脂肪酶较多的是油料作物的种子,如蓖麻籽、油菜籽,当油料种子发芽时,脂肪酶能与其他的酶协同发挥作用催化分解油脂类物质生成糖类,提供种子生根发芽所必需的养料和能量；动物体内含脂肪酶较多的是高等动物的胰脏和脂肪组织,在肠液中含有少量的脂肪酶,用于补充胰脂肪酶对脂肪消化的不足,在肉食动物的胃液中含有少量的丁酸甘油酯酶,在动物体内,各类脂肪酶控制着消化、吸收、脂肪重建和脂蛋白代谢等过程；细菌、真菌和酵母中的脂肪酶含量更为丰富（Pandey等）,由于微生物种类多、繁殖快、易发生遗传变异,具有比动植物更广的作用pH、作用温度范围以及底物专一性,且微生物来源的脂肪酶一般都是分泌性的胞外酶,主要的发酵微生物有黑曲霉,假丝酵母等等,适合于工业化大生产和获得高纯度样品,因此微生物脂肪酶是工业用脂肪酶的重要来源,一般不同来源的脂肪酶特性也不一样并且在理论研究方面也具有重要的意义,脂肪酶测定方法包括:⒈粗酶液的制备用电子天平分别称取粗脂肪酶0.010g、0.020g和0.030g,用蒸馏水溶解并定容至100mL,配成浓度分别为0.01%、0.02%和0.03%的粗酶液,⒉实验设计本实验以10mL色拉油为底物,以酶用量、水解温度、反应时间为因素,通过酸价的测定选定其水解的最佳条件,

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脂肪酶即三酰基甘油酰基水解酶,它催化天然底物油脂水解,生成脂肪酸、甘油和甘油单酯或二酯,脂肪酶基本组成单位仅为氨基酸,通常只有一条多肽链,它的催化活性仅仅决定于它的蛋白质结构,脂肪酶测定方法有:粗脂肪酶活力的测定在最佳水解条件下,分别测得粗脂肪酶和标准脂肪酶水解液的酸价X1、X2,根据公式U1/U=X1/X2求得粗脂肪酶的活力,其中U1为粗脂肪酶活力,U为标准脂肪酶活力,标准脂肪酶液的配制本实验以10mL色拉油为底物,以酶用量、水解温度、反应时间为因素,通过酸价的测定选定其水解的最佳条件,用色拉油作底物不太妥,一般是用橄榄油,化学纯的,