融合蛋白的纯化

2018-10-27 男 | 25岁

问题描述：最近要纯化原核表达蛋白,选择了GST 纯化系统,但不清楚GST融合蛋白纯化的原理?

回答（2）

张慧芝 回答时间：2018-10-27

GST纯化系统其实就是凝胶亲和层析系统,
该纯化柱中,凝胶手臂上通过硫键结合一个谷胱甘肽,然后利用谷胱甘肽与谷胱甘肽巯基转移酶（即GST）之间酶和底物的特异性作用力,使得带GST标签的融合蛋白能够与凝胶上的手臂谷胱甘肽结合,从而将带标签的蛋白与其他蛋白分离开,

罗正强 回答时间：2018-10-27

谷胱甘肽通常有氧化型GSSG和还原型GSH,当我们使用GSH洗脱时,GSH会与凝胶上的谷胱甘肽竞争结合融合蛋白,从而将目标蛋白洗脱,

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