判断血红素

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血气分析仪直接测定
ABL520型血气分析仪,雷度公司（Radiometer Medical A/S）产品,由测量系统和控制单元组成,能够直接给出血红蛋白溶液的很多参数,像血红蛋白的浓度、P50,并且还能给出高铁血红蛋白的浓度,

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比色法(文齐氏液)
高铁血红蛋白形成剂能使红细胞中的血红蛋白(Hb)变成高铁血红蛋白(methemoglobin,MetHb), 后者能与氰离子迅速结合成氰化高铁血红蛋白络合物,但注意形成的MetHb的峰值期以不超过原血中Hb的30％为宜,
1、 测定前预先配制pH6.6的0.1M PBS缓冲液,20%的铁氰化钠溶液以及10%的中性液（20%NaCN水溶液+20%冰醋酸,实验前1小时内配制）,
2、 准备2个玻璃比色皿（加盖）,分别作为空白管和测定管,空白管中加入10ml的0.1M PBS缓冲液,在测定管中分别加入0.1ml血红蛋白溶液,然后用PBS缓冲液稀释至10ml,混合均匀,2min后波长630nm下比色,以空白管校正零点,测定测定管的吸光度A1 ,
3、 在测定管中加入1滴NaCN中性溶液,混合均匀,2min后波长630nm下比色,以空白管校正零点,测定测定管的吸光度A2,
4、 在测定管中加入20%的铁氰化钠溶液0.1ml,混合均匀,2min后波长630nm下比色,以空白管校正零点,测定测定管的吸光度A3,
5、 在测定管中加入中性NaCN溶液1滴,混合均匀,2min后波长630nm下比色,以空白管校正零点,测定测定管的吸光度A4,
6、 按下面公式计算高铁血红蛋白(MetHb)含量,注意样品应同时测量三份并取平均值为检测结果:
MetHb% = (A1-A2)/( A3-A4)×100% (公式2-1)