淋球菌抗体检测

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包括涂片检查,培养检查,抗原检测,基因诊断,药敏试验及产青霉素酶淋球菌(PPNG)测定,


　　1.涂片检查 取患者尿道分泌物或宫颈分泌物,作革兰染色,在多形核白细胞内找到革兰阴性双球菌,涂片法特异度较高,对急性患者灵敏度也较高,对慢性患者灵敏度较差,女性宫颈分泌物中杂菌多,敏感性和特异性较差,阳性率仅为50%～60%,且有假阳性,适合用培养法检查,慢性淋病由于分泌物中淋球菌较少,阳性率低,因此要取前列腺按摩液,以提高检出率,咽部涂片发现革兰阴性双球菌不能诊断淋病,因为其他奈瑟球菌属在咽部是正常的菌群,需做糖发酵试验进一步诊断,另外对症状不典型的涂片阳性应作进一步检查,


　　2.培养检查 淋球菌培养是诊断的重要佐证,培养法对症状很轻或无症状的男性、女性患者都是较敏感的方法,只要培养阳性就可确诊,也是目前诊断无症淋球菌感染的唯一可靠的方法,在基因诊断问世以前,培养是世界卫生组织推荐的筛选淋病的惟一方法,目前国外推荐选择培养基有改良的Thayer-Martin(TM)培养基和New York City(NYC)培养基,国内采用巧克力琼脂或血琼脂培养基,均含有抗生素,可选择地抑制许多其他细菌生长,在36℃,70%湿度,含5%～10%二氧化碳(烛缸)环境中培养,24～48h观察结果,培养后还需进行菌落形态,革兰染色,氧化酶试验和糖发酵试验等鉴定,培养阳性率男性80%～95%,女性80%～90%,

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1.抗原检测


　　(1)固相酶免疫试验(EIA):可用来检测临床标本中的淋球菌抗原,先用稀释的标本液 包被载体, 然后加入抗淋球菌抗体, 再加入辣根过氧化酶偶联的羊抗兔免疫璩蛋白,以上各步均经温育,水洗,最后加底物显色,并用分光光度计记录数据,分析结果,


　　(2)直接免疫荧光试验:通过荧光标记的单克隆抗体直接检测淋球菌外膜蛋白-1,此法不仅敏感性较好, 且无交叉反应,是一种快速而准确的方法,在女性患者的标本检验中也获得较好的效果,


　　(3)协同凝集试验 用抗淋球菌蛋白I单克隆抗体致敏葡萄球菌A蛋白可与淋球菌发生协同凝集反应,此试验简易、快速、不需特豫设备, 敏惑性与特异性均较高,


　2.基因诊断


　　(1)基因探针诊断:淋球菌的基因探针诊断,所用的探针有:质粒DNA探针、染色体基因探针和rRNA基因探针,基因探针诊断的敏感性较差,DNA探针法的敏感性与特异性均较高,是诊断淋病的一种快速可靠的方法,但此法由于条件所限,不便普及,


　　(2)基因扩增检测:PCR技术的出现进一步提高了淋球菌检测的灵敏性,它具有快速、灵敏、特异、简便的优点,可以直接检测临床标本中极微量的病原体,但因实验条件要求高,技术难掌握,操作时要防止污染,以免出现假阳性,


　　5.药敏试验 在培养阳性后进一步作药敏试验,用纸片扩散法做敏感试验,或用琼脂平皿稀释法测定最小抑菌浓度(MIC),用以指导选用抗生素,


　　6.PPNG检测 β内酰胺酶,用纸片酸度定量法,使用Whatman I号滤纸PPNG菌株能使其颜色由蓝变黄,阳性为P-PPNG,阴性为N-PPNG,