噬菌体分离纯化实验

2018-11-20 男 | 27岁
回答(2)
熊平安 回答时间:2018-11-20

使噬菌体与大肠杆菌分离,如果搅拌不充分,噬菌体与大肠杆菌没有分离,噬菌体与细菌共存于沉淀物中,从而造成沉淀物中放射性检测不准确,

高锡云 回答时间:2018-11-20

如果只是搅拌而不离心,的确也能分开,但是需要的时间长,细菌会裂解,不知道你有没有注意到教科书上的原话,这个实验一定要在“短时间”保温后搅拌、离心让噬菌体和细菌分开,搅拌和离心的目的是为了将噬菌体蛋白质外壳同侵入大肠杆菌的噬菌体DNA分开,以便对放射性元素跟踪测试,离心会使质量较轻的噬菌体颗粒进入上清液,而被感染的细菌则形成沉淀,但这必须保证是在菌体裂解之前进行,噬菌体侵染细菌的速度很快,在37度的条件下大约40分钟就可以产生100到300个子代噬菌体,从感染到释放前的这段时间叫潜伏期,大约经历20到30分钟,短时间的保温可获得足够数量的子代噬菌体,但又必须避免超出潜伏期(确保溶液分层),所以离心要在“短时间”保温后及时进行,

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